细胞免疫荧光检测

日期: 2019-03-18
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实验原理

       细胞免疫化学与免疫组织化学实验都是依据抗原抗体反应和化学显色的原理,采用标记的特异性抗体对组织或细胞内抗原的分布进行原位检测技术。细胞免疫化学将培养处理后的细胞爬片、固定、破膜、封闭后,加入一抗与抗原蛋白结合,再加入标记有荧光素的二抗与一抗进行反应,最后通过激光共聚焦扫描显微镜进行荧光拍摄来显示细胞中靶蛋白的表达变化和定位。

激光共聚焦扫描显微镜(Confoccal Laser Scanning Microscope, CLSM)是现在最先进的细胞生物医学分析仪器之一,采用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬间成像的物点。从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦。由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜3倍。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。

 

技术应用

检测靶蛋白如内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、细胞因子、细胞表面抗原、肿瘤标志物。

 


Case / 精彩案例
2019 - 03 - 18
研究项目概况
2019 - 03 - 18
样本运输条件及保存条件: 组织样本: 1.    组织样本应立即放置-20℃。 2.    运输过程采用液氮,干冰,市内运输可选用冰袋。 3.    样本量不低于100 mg。 4.    请告知组织种属和类型,如肝脏、脾脏等。 细胞样本 1....
2019 - 03 - 18
1、组织样本         客户自己固定的组织样本需满足要求: (1)    固定液体积至少为组织样本体积5倍以上; (2)    组织样本厚度不要超过5毫米(灌注固定的脑组织除外); (3)    问清楚客户组织样本包埋切面方向;...
2019 - 03 - 18
常见问题FAQ Q : CCK-8试剂盒检测细胞增殖和毒性的优点有哪些?A : CCK-8较传统的MTT法优点在于1) MTT被线粒体内的一些脱氢还原酶还原成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解,而CCK-8产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤; 2) CCK-8检测灵敏度更高,更加稳定; 3)酚红和血清对其测定无明显影响; 4)不必去...
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