慢病毒属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中最为人所知的是人类免 疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1 直径约 120nm,含两条正链 RNA,可有效的进入细胞核中,对分裂 期细胞及非分裂期细胞均具有很高的感染效率。慢病毒感染细胞后可将所携带的基因整合到细胞基 因组中,并且长时间持续稳定表达,同时能够随细胞分裂稳定遗传下去,因此成为导入外源基因的 有效工具。慢病毒载体是以 HIV-1 为基础改造获得的基因治疗载体,通过去除致病基因,同时减少辅助质粒与载体质粒的同 源性,使慢病毒具有了滴度更高、生物安全性更好、导入外源片段的能力更强等特性。目前慢病毒系统已经广泛应用到基因过表达、RNA 干扰、miRNA 研究及基因敲除等功能研究的细胞实验和动物实验中。慢病毒介导的非定点基因敲入细胞       基于慢病毒可将外源片段稳定整合入宿主细胞基因组的特点,该方法特别适合于构建基因表达或干扰的稳转细胞株。慢病毒感染法比质粒转染更容易操作,并且对各类细胞的转导效率都很高。合生基因为科研用户提供慢病毒介导的非定点基因敲入细胞希工程改造服务。
发布时间: 2019 - 03 - 18
促销时间:2019年4月1日至2019年10月31日促销服务内容:人类全外显子组捕获测序促销价格:2000元/样本(10样本起订)服务规格:Agilent V5捕获芯片,100X覆盖度,10G数据量,并包含后期生物信息分析。         外显子(exon)是真核生物基因的一部分,包含着合成蛋白质所需要的信息。全部外显子被称为“外显子组”(Exome)。外显子组测序(Exome sequencing)是指利用序列捕获技术将全基因组外显子区域DNA捕捉并富集后进行高通量测序的基因组分析方法。由于外显子组测序只需针对外显子区域的DNA即可(例如:人类外显子组只占人类基因组长度的约1%,但是目前由DNA变异引起的疾病估计有85%以上来自于外显子组区域的变异),因此远比进行全基因组序列测序更简便、经济、高效,其目标区域覆盖度也更高,便于变异检测。其实验部分主要包含外显子序列捕获和深度测序两个部分。 生物信息分析 1. 去除接头序列2. 序列质量剪切3. 参考序列mapping4. SNPs和InDels的检测5. 基因注释分析 样品要求1)样品纯度:OD 260/280值应在1.8~2.0 之间; RNA应去除干净2)样品浓度:最低浓度不低于50ng/µl;3)样品总量:每个样品总量尽量不少于5µg;4)样品保存:保存在H20或TE (pH 8.0)中;5)样品运输:冰袋运输,且在运输过程中请用parafilm将管口密封好,以防出现污染。6)全血样本:1ml, EDTA抗凝,冰袋运输。7)建议在条件允许情况下,提供可供两次样品制备的量,以确保实验质量及延续性。
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转录组研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有 RNA 的总和,包括 mRNA 和非编码 RNA,是研究基因功能及结构研究的基础和出发点。通过新一代高通量测序技术,可以全面快速地获得某一物种特定组织或器官在某一状态下的所有转录本序列信息。所谓巧妇难为无米之炊,如何选择样本,怎样设计对照更有助于我们挖掘数据呢?下面给大家分享一些选取标准。样本差异不同组织细胞中基因表达水平差异明显,这为转录组分析提供了天然的研究材料。比如目前特定的细胞标志基因开发,以及肿瘤或疾病分子标志物的研究都是建立在这一基础上。处理差异通俗讲就是处理与非处理组,根据转录组的测序结果展现两者分子水平上的差异用于后续更深层次研究。而这个处理可分为物理法(物理损伤、针灸等)、化学法(抑制剂、化学物品等)和生物法(病毒、细菌侵染等)。Acupuncture promotes angiogenesis after myocardial ischemia through H3K9acetylation regulation at VEGF gene[J]. PloS one, 2014.通过电针刺(EA)刺激结扎冠状动脉左前降支建立大鼠心肌缺血模型(MI),选取健康大鼠(Control)和健康大鼠 EA 处理组(CEA)作为对照组。测序发现EA 刺激可以激活 VEGF 信号通路,进而修复心肌缺血症状。剂量差异在研究毒剂或药物时,不可避免要设计实验组间处理剂量的差异,用于描述试剂的作用效力。Functionally defined therapeutic targets in diffuse intrinsic pontine glioma[J]. Nature medicine, 2015.通过用不同剂量的不同抑制剂处理神经胶质瘤细胞(Diffuse intrinsic pontine glioma ,D...
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促销时间:2019年4月1日----2019年10月31日促销服务内容:蛋白质组定量检测服务—iTRAQ促销价格:4200元/样本(8样本起订)服务规格:定量蛋白质组检测结果,包含从蛋白提取到后期生物信息分析(GO、Pathway分析等)的全程式服务流程。       iTRAQ (isobaric tag for relative and absolute quantitation)是基于高度敏感性和精确性的串联质谱方法,不需要凝胶,既可获得相对定量和绝对定量蛋白质组学的分析结果。iTRAQ方法优势:•既可以相对定量,也可以绝对定量;•最多可同时对8组样品进行定量比较,提高了实验通量;•检测范围广,一次性可鉴定出500-1000种蛋白;•可得出不同样品或者组间的差异表达蛋白 ;•可通过差异蛋白进行GO、Pathway富集分析,进而得出生物网络调控机制;•与二级质谱鉴定相结合,提高了鉴定结果的可靠性;•操作简便,不需要更多的烦琐操作。    此外,我公司还有高通量测序、基因芯片、生物信息等服务。
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