免疫组化

实验原理

       免疫组化,是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使结合抗体的显色剂进行显色来确定组织或细胞内抗原,对其进行定位、定性及相对定量的研究。是生命科学研究中常用且重要的实验方法。

显然,免疫组化(IHC)结果获取过程中最关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大,但其实免疫组化(IHC)过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化(IHC)染色经常很难获得最优的结果,但通常可以通过对一些实验流程的变量(例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等)进行调整实现优化。


实验步骤

免疫组化 


 技术优势

1. 特异性强

免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2. 敏感性高

在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。

3. 定位准确、形态与功能相结合

       该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

客户提供

1 、待进行免疫组化的实验材料及材料信息,我们接受以下形式的实验材料

组织标本

根据抗原来选择适宜的固定液,时间以12-24h左右最佳

细胞片

固定后晾干,低温、密闭保存

石蜡块

取材完整、组织固定充分的合格蜡块

石蜡切片

涂有粘片剂的优质石蜡切

 

2 、实验所需要的抗体信息及标记方式

我们提供:详细实验总结报告(包括实验方法、拍照结果、信号强度分析等);提供实验后的切片。

 

 

 

 

 


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实验原理

       免疫组化,是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使结合抗体的显色剂进行显色来确定组织或细胞内抗原,对其进行定位、定性及相对定量的研究。是生命科学研究中常用且重要的实验方法。

显然,免疫组化(IHC)结果获取过程中最关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大,但其实免疫组化(IHC)过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化(IHC)染色经常很难获得最优的结果,但通常可以通过对一些实验流程的变量(例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等)进行调整实现优化。


实验步骤

免疫组化 


 技术优势

1. 特异性强

免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2. 敏感性高

在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。

3. 定位准确、形态与功能相结合

       该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

客户提供

1 、待进行免疫组化的实验材料及材料信息,我们接受以下形式的实验材料

组织标本

根据抗原来选择适宜的固定液,时间以12-24h左右最佳

细胞片

固定后晾干,低温、密闭保存

石蜡块

取材完整、组织固定充分的合格蜡块

石蜡切片

涂有粘片剂的优质石蜡切

 

2 、实验所需要的抗体信息及标记方式

我们提供:详细实验总结报告(包括实验方法、拍照结果、信号强度分析等);提供实验后的切片。

 

 

 

 

 


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2019 - 03 - 21
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