HE染色

实验介绍

        苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

       细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强。而细胞浆则相反,它含有碱性物质,和酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶原纤维等呈不同程度的红色。

如何处理组织样本?

首先需要快速取材,然后尽快的放入适量的固定液中固定,固定液需根据不同组织类型选择合适的固定液。下面给大家列举几种常见组织的固定液选择方法:

 

1、眼球

固定液选择:FAS眼球固定液

注 意 事 项:将眼球组织轻柔摘取后放入FAS眼球固定液中固定24H,结合本公司制片时的特殊手法结果更有保障,固定液是组织的10-20倍。

 

2、肌肉   

固定液选择:GD固定液

注 意 事 项:将新鲜肌肉组织取下后放入GD固定液中固定24H以上,固定液是组织的10-20倍。

 

3、睾丸

固定液选择:Bouin's固定液

注 意 事 项:固定24H后转移至75%酒精保存运输,固定液是组织的10-20倍。

 

4、脂肪

固定液选择:脂肪专用固定液

注 意 事 项:将新鲜脂肪组织取下后放入脂肪专用固定液中固定24H以上,需要使用脱脂棉花将组织压在固定液中,固定液是组织的10-20倍。

 

5、骨、牙齿组织

固定液选择:通用型组织固定液

注 意 事 项:固定24H后再脱钙,固定液是组织的10-20倍。

 

6、其他动物组织

固定液选择:通用型组织固定液

注 意 事 项:组织需要固定24H,固定液是组织的10-20倍。

 

哪些因素会影响到HE染色结果呢?

1、固定不充分,会直接影响组织HE染色出现泛白现象。

2、组织经过强酸(比如酸脱钙的骨组织)处理,会出现核不着色的现象。

 

3、组织固定过久,固定液成分里面的甲醛会变成甲酸,破坏细胞核,导致HE染色后细胞核亦不易着色,颜色会与胞浆一致。

 

4、苏木素染色后分化非常重要,分化不好会影响伊红的着色效果。

 


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实验介绍

        苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

       细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强。而细胞浆则相反,它含有碱性物质,和酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶原纤维等呈不同程度的红色。

如何处理组织样本?

首先需要快速取材,然后尽快的放入适量的固定液中固定,固定液需根据不同组织类型选择合适的固定液。下面给大家列举几种常见组织的固定液选择方法:

 

1、眼球

固定液选择:FAS眼球固定液

注 意 事 项:将眼球组织轻柔摘取后放入FAS眼球固定液中固定24H,结合本公司制片时的特殊手法结果更有保障,固定液是组织的10-20倍。

 

2、肌肉   

固定液选择:GD固定液

注 意 事 项:将新鲜肌肉组织取下后放入GD固定液中固定24H以上,固定液是组织的10-20倍。

 

3、睾丸

固定液选择:Bouin's固定液

注 意 事 项:固定24H后转移至75%酒精保存运输,固定液是组织的10-20倍。

 

4、脂肪

固定液选择:脂肪专用固定液

注 意 事 项:将新鲜脂肪组织取下后放入脂肪专用固定液中固定24H以上,需要使用脱脂棉花将组织压在固定液中,固定液是组织的10-20倍。

 

5、骨、牙齿组织

固定液选择:通用型组织固定液

注 意 事 项:固定24H后再脱钙,固定液是组织的10-20倍。

 

6、其他动物组织

固定液选择:通用型组织固定液

注 意 事 项:组织需要固定24H,固定液是组织的10-20倍。

 

哪些因素会影响到HE染色结果呢?

1、固定不充分,会直接影响组织HE染色出现泛白现象。

2、组织经过强酸(比如酸脱钙的骨组织)处理,会出现核不着色的现象。

 

3、组织固定过久,固定液成分里面的甲醛会变成甲酸,破坏细胞核,导致HE染色后细胞核亦不易着色,颜色会与胞浆一致。

 

4、苏木素染色后分化非常重要,分化不好会影响伊红的着色效果。

 


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