siRNA产品
技术概述
RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。
由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地将特定的基因沉默,从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种有力的工具。RNAi技术可以应用到包括功能学,药物靶点筛选,细胞信号传导通路分析,疾病治疗等。
成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。专业的设计人员凭借多年的设计经验为您提供完整的RNAi实验设计服务和优化的siRNA,shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计,精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。
客户需提供
1、客户提供干扰序列:需要提供RNA干扰的目的基因的名称(或Gene Bank号)、序列,并与我们共同讨论实验方案;
2、客户不提供干扰序列:由我们代为设计三条siRNA干扰序列。
质量保证
1、客户提供的干扰序列我们只负责构建及测序正确;
2、由HTHealth代为设计的三条干扰序列,保证其中一条干扰效率不低于70%。
RNAi产品承诺
我们承诺3个RNAi产品中至少有一个有效RNAi产品,如果未能筛选到有效靶点,我们将免费为研究者重新设计并合成新的RNAi产品;
有效RNAi产品:指对目的基因mRNA水平的敲减效率不低于70%。
实验介绍
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1病毒为基础发展起来的基因研究载体,区别于逆转录病毒载体,它对于分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
HTHealth的慢病毒系统属于第三代慢病毒系统,生物安全性高,采用VSVG包膜,宿主范围广泛,慢病毒滴度高,其病毒滴度可以达到10^9TU/mL。
HTHealth的慢病毒载体有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、GFAP、NSE等多种启动子可供选择;而且还有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多种荧光标记蛋白可供选择;抗生素筛选基因有Puromycin、Neomycin、Hygromycin等可供选择。
HTHealth可以提供非整合型慢病毒包装,在分裂细胞中瞬时表达,在非分裂细胞中可稳定表达,不会插入到宿主细胞基因组中,减少插入突变的风险;而且还可以提供诱导表达慢病毒的包装,如Tet-On系统等。
腺病毒包装
腺病毒(Adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的病毒颗粒,为线状双链DNA分子,约含35000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。
HTHealth的腺病毒为5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表达基因序列E1区和E3区。E1是腺病毒复制所必须的,E1的缺失使其不能自身复制,只能依靠包装细胞如HEK293细胞提供的反式互补进行复制扩增,以此保证腺病毒的安全性。E3基因表达的蛋白能对抗宿主的抗病毒防御系统,E3区的去除能减少宿主的体内免疫反应。
HTHealth的腺病毒包装采用的是AdMax系统,通过Cre-loxp重组酶,使共转染到HEK293细胞中的腺病毒载体穿梭质粒和骨架质粒(腺病毒基因组质粒)在重组酶的作用下产生重组腺病毒,获得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以达到1×10^12pfu/ml 。
HTHealth的腺病毒载体有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、等多种启动子可供选择;而且还有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多种荧光标记蛋白可供选择。
腺相关病毒包装
腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV),也称腺伴随病毒,属于微小病毒科依赖病毒属,是目前发现的一类结构简单的单链DNA缺陷型病毒,需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。
HTHealth的腺相关病毒血清型种类齐全,可提供AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV-DJ共10种血清型,而且还可以包装双链AAV(scAAV)。
HTHealth的腺相关病毒载体有CMV、mCMV、CAG、PGK、RK1、EF1a、GFAP等多种启动子可供选择;而且还有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多种荧光标记蛋白可供选择;同时可以提供诱导型AAV病毒的包装,如Tet-On系统等。
服务提示
1. 需客户提供相关基因信息(基因ID、名称、序列等)。
2. HTHealth将提供完整的实验流程报告、测序文件、实验图片、实验数据等。
3. HTHealth还可提供腺相关病毒感染各类细胞及动物的相关实验,为您提供全面的实验服务,详情请咨询技术支持。