线粒体面膜电位

实验原理

 

      JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在,分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时,主要以单体形式存在,激发波长为527nm,呈绿色荧光;当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时,形成聚合物,发出红色的荧光,激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光,根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。

 

服务介绍

       大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(MMP)的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。


实验流程

1. 细胞培养;

2. 用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性对照组和阳性对照组,收集细胞;

3. 用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;

4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×Incubation Buffer,混匀并预热至37℃;

5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer,加入1μL JC-1,涡旋混匀配成JC-1工作液;

6. 取500 μL JC-1工作液将细胞均匀悬浮,37℃,5% CO2的培养箱中孵育15~20min。

7. 室温离心(2000rpm,5min)收集细胞,用1×Incubation Buffer洗两次;

8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新悬浮细胞;

9. 流式细胞仪检测,分析。

 

客户提供

细胞株(冻存株或培养好的细胞),相关药品或MMP检测试剂盒(可代购)

 

我们提供

实验步骤、结果图、数据结果和分析报告

实验周期:1-2周,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。

 


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实验原理

 

      JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在,分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时,主要以单体形式存在,激发波长为527nm,呈绿色荧光;当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时,形成聚合物,发出红色的荧光,激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光,根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。

 

服务介绍

       大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(MMP)的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。


实验流程

1. 细胞培养;

2. 用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性对照组和阳性对照组,收集细胞;

3. 用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;

4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×Incubation Buffer,混匀并预热至37℃;

5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer,加入1μL JC-1,涡旋混匀配成JC-1工作液;

6. 取500 μL JC-1工作液将细胞均匀悬浮,37℃,5% CO2的培养箱中孵育15~20min。

7. 室温离心(2000rpm,5min)收集细胞,用1×Incubation Buffer洗两次;

8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新悬浮细胞;

9. 流式细胞仪检测,分析。

 

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细胞株(冻存株或培养好的细胞),相关药品或MMP检测试剂盒(可代购)

 

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实验周期:1-2周,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。

 


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2019 - 03 - 21
简介:     HTHealth拥有一支语言功底深厚、经验丰富、敬业守信的翻译队伍和多学科背景的专家团队。我们的工作人员由在生命医学领域具有丰富英文科学论文写作、发表及修改经验和具有中国成长背景的留美博士及地道美国英文专家共同为您修改您在生命科学、医学、农学、环境、食品等相关领域的学术论文并免费提供论文发表的全程咨询,帮助您的论文在SCI(Science Citation Index)刊源国际学术期刊上早日发表! 我们的服务: 1、提供中英文医学论文评估、校对、编辑、翻译、改写服务,并免费为论文提供协助、咨询和投稿信、修改稿及答复信的校对服务,直至论文发表为止。承诺:“你不放弃,我们决不放弃!”我们相信,经过我们的加工,绝大多数论文最终都能在英文医学杂志中找到合适的归宿。2、论文全程发表服务是全程一对一的的全程服务,一次收费全程服务到底,全...
2019 - 03 - 21
全基因组测序分为:从头测序(de novo sequencing)和重测序(re-sequencing)。       从头测序(de novo):不需要任何参考基因组信息即可对某个物种的基因组进行测序,利用生物信息学分析方法进行拼接、组装,获得该物种的基因组序列图谱,从而推进该物种的后续研究。基因组重测序: 是对有参考基因组物种的不同个体进行的基因组测序,并在此基础上对个体或群体进行差异性分析。基因组重测序主要用于辅助研究者发现单核苷酸多态性位点(SNPs)、拷贝数变异(CNV)、插入/缺失(Indel)等变异类型,以较低的价格将单个参考基因组信息扩增为生物群体的遗传特征。全基因组重测序在人类疾病和动植物育种研究中广泛应用。技术路线 生物信息分析
2019 - 03 - 21
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2019 - 03 - 10
实验介绍        苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。       细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强。而细胞浆则相反,它含有碱性物质,和酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶原纤维等呈不同程度的红色。如何处理组织样本?首先需要快速取材,然后尽快的放入适量的固定液中固定,固定液需根据不同组...
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