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产品推荐 / Products
  • 发布时间: 2019 - 03 - 21
    免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。       免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育及荧光检测等。细胞片制备(通俗的说法是细胞爬片)是免疫荧光实验的第一步,细胞片的质量对实验的成败至关重要,原因很简单,如果发生细胞掉片,一切都无从谈起。这一步关键的是玻片(Slides or Coverslips)的处理以及细胞的活力,有人根据成功经验总结出许多有益的细节或小窍门,非常值得借鉴。固定和通透步骤重要的是根据所研究抗原的性质选择适当的固定方法,合适的固定剂和固定程序对于获得好的实验结果是非常重要的。免疫荧光中的封闭和抗体孵育与其它方法(如ELISA或Western Blot)中的相同步骤是类似的,主要的区别在于免疫荧光实验中要用到荧光抗体,因此必须谨记避光操作,此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实...
  • 发布时间: 2019 - 03 - 09
    实时荧光定量PCR检测实验原理        实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应进程,最后通过内参对照计算目的基因表达差异分析或通过标准曲线对未知模板进行定量分析,具有操作简便、快速高效、高通量、高敏感性等特点。实验流程 SYBR GREEN 法和 TaqMan 探针法的区别方法优点缺点应用SYBR GREEN 法方便快捷,不必针对各个基因设计合成TaqMan探针,具有价格优势。无模板特异性,对引物特异性要求较高,需进行熔解曲线分析;灵敏度相对较低。应用于基因的差异表达分析,比如RNA干扰效果确认。TaqMan 探针法荧光化合物标记到特异性的寡核苷酸上,具有高度特异性,重复性好,荧光信号强。只适合一个特定的目标,探针价格较高。通常应用于基因拷贝数的确定,在临床诊断中常用,比如病毒和病原菌定量检测。 技术应用 定量方法原理技术应用绝对定量(Absolute Quantification,AQ)是测定目的基因在样本中的分子数目,即通常所说的拷贝数。病原体检测;转基因食品检测;基因表达研究。相对定量(Relative Quantification,RQ)测定目的基因在两个或多个样本中的含量的相对比例,而不需要知道它们在每个样本中的拷贝数。基...
  • 发布时间: 2019 - 03 - 09
    细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。       细胞划痕法是研究细胞转移侵袭的三大方法之一(另外两种方法分别为Transwell实验和小管形成实验),是专用于细胞迁移的检测方法,在研究肿瘤细胞转移的文章中出现频率较高。【应用范围】1.  各类肿瘤细胞侵袭能力研究            2.  细胞信号通路相关研究                    3.  肿瘤转移相关基因、蛋白、miRNA、lncRNA、circRNA等相关功能研究4.  抗肿瘤药物筛选5.  EMT类相关研究【品质保证】 1.  平直的划痕打造出精品结果;  2. &#...
  • 发布时间: 2019 - 03 - 21
    技术原理       石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已广泛地用于其他许多学科领域的研究中。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤,因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断。特点       石蜡切片标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。       冰冻切片制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断.组织变化不大,能很好保存脂肪,类脂等成分。能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类,特别是对于那些对有机溶剂或热的...
  • 发布时间: 2019 - 03 - 21
    Western blot        免疫印迹(immunblotting)又称蛋白质印迹(western blot),他是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现在已成为蛋白分选的一种常规技术。免疫印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分选。western blot一般步骤:蛋白质抽提,蛋白质定量,变性聚丙稀酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE),蛋白质转移,western blot膜的封闭和抗体孵育,western blot结果检测,western blot数据分析,提供实验报告。western blot服务内容:专业的队伍,提供完整的实验步骤和结果,提供专业的数据分析,提供电子版扫膜结果,以及灰度值分析。 服务提示1 客户可提供目标蛋白一抗,或者由HTHealth代购。 2. HTHealth可免费提取蛋白、提供二抗、免费的内参,如GAPDH,β-actin,LaminB等。 3. 我们将保留原始胶片及实验报告。
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时间: 2019 - 03 - 09
实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不存在整合位点的问题,不会受到周围染色体元件的影响;瞬时转染所需的人力和时间比稳转少,但DNA摄入效率和表达水平在不同实验中差异较大,因此表达不长久也不稳定。      稳转细胞株的特点:经合适的药物浓度进行药物筛选后,可得到外源DNA整合到宿主染色体的细胞,这些细胞可以长时间表达外源目的基因,稳定表达细胞株弥补了瞬时感染(或转染)实验中外源基因表达时间短的缺陷,便于长期观察。稳转细胞的筛选需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物,常用的抗性筛选有嘌呤霉素(puromycin)、潮霉素(hygromycin)、新霉素(neomycin)、灭稻瘟素(Blasticidin)等。若实验需求构建稳转细胞株,我们建议通过慢病毒感染细胞进行药物筛选的方法,此方法较质粒转染可以更加有效的将外源基因整合入基因组,且整合位点处于转录相对活跃的区域,从而获得更加高效表达外源基因的稳转株细胞。       HTHealth具有丰富的稳转细胞系构建经验,可为客户提供悬浮细胞/贴壁细胞的过表达/干扰基因多克隆/单克隆稳转细胞系构建服务。 技术应用如要观察外源基因表达后较短时间内就能检测的细胞功能,可使用瞬时转染/感染。即在转染后24至96小时内收获细胞;如需要长期观察外源基因表达的作用,进行长期药理学研究、基因治疗研究、遗传调控机制研究或需要进行大规模蛋白合成则需要构建稳转株。
产品名称: Transwell
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时间: 2019 - 03 - 09
实验原理      细胞迁移是指细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动,涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反应、感染和癌症转移等生理现象。因此通过对细胞迁移的研究,对阻止癌症转移、异体植皮等医学应用方面具有一定意义。细胞侵袭实验则是研究肿瘤细胞对基质膜消化后的迁移运动,肿瘤细胞须经血管基底膜穿入深面间质后才能侵袭组织和转移至远处。       肿瘤细胞侵袭迁移能力的改变通常采用Transwell小室进行检测。Transwell小室是一种膜滤器,也认为是一种有通透性的支架(Permeable Supports)。这层膜带有微孔,孔径大小0.1-12.0μm,根据不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜。将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可用影像到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 技术应用应用包括细胞迁移、趋化(趋化因子对细胞的定向诱导),侵袭(癌细胞侵袭上指肿瘤细胞向局部侵犯或远处转移),共培养(同一培养体系里,两种细胞非接触性培养)。细胞迁移侵袭上涉及多个步骤、高度完整的过程,在癌症转移、动脉粥样硬化和关节炎等疾病恶化中起重要作用。
产品名称: 血管形成实验
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时间: 2019 - 03 - 09
实验原理       血管形成体外模型可分为细胞水平的增殖实验、迁移实验和管腔形成实验,以及器官水平的人胎盘血管段培养模型和大鼠动脉环模型。目前通常所说的血管形成实验是指管腔形成实验。管腔形成反映毛细血管的早期过程,是体外检查内皮细胞功能的指标。        血管形成过程中内皮细胞会形成细胞条索,然后形成管腔,体外在特定条件下如基质胶、胶原等培养时也能形成管腔。药物通过抑制管腔形成或使形成的管腔断裂来达到抑制血管形成的作用。借助计算机软件计算小管数及小管之间的连接数及小管的长度和面积,可定量分析药物对管腔形成的影响。       在原有的毛细血管和(或)微静脉基础上通过血管内皮细胞的迁移和增殖,从已存在的血管处以芽生或非芽生(套迭)形式形成新的、以毛细血管为主的血管系统过程称之为血管生成,通过体外模拟血管生成的过程对研究血管形成机制、发现促进或抑制血管生成药物十分重要。
型号:
时间: 2019 - 03 - 09
实验介绍        细胞系因其具有无限传代增殖、体外培养、培养条件简单等原因,如今已被应用于各类疾病的研究中。         现在实验室之间的细胞系共享很普遍,污染了的细胞系被反复使用,和用错细胞系的实验研究经常发生,而这种情况很有可能在一些实验室持续数年或数十年。据统计国外实验室约20%细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复等严重后果,也浪费了研究者大量时间、精力和金钱。2011年美国国家标准学会专门颁布了一份细胞STR(ShortTandemRepeat,短串联重复序列)鉴定标准。STR鉴定目前已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定,越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分型数据。         HTHealth近年来从国内各大细胞库引入细胞系,目前已筛选出280多种状态良好的细胞系,构建起华北地区较大的一家细胞库。HTHealth本着严谨负责的态度,对细胞库中几乎所有的人源细胞系进行了STR分型鉴定,目前160多种人源细胞系STR鉴定结果为阳性,为您的科研工作提供安全保障。
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2019 - 03 - 11
体外药物筛选对候选药物进行筛选,可以提高新药研发的成功率,减少研发费用,缩短新药的研发时间。HTHealth拥有近10年的药物筛选经验,整合了一整套先进的筛选技术,可以开展药物筛选研究以支持委托方的药物开发项目。昭衍可以开展的筛选服务包括药物的有效性筛选(体内和体外)、生物利用度、代谢筛选和早期毒性筛选。 有效性筛选HTHealth可以开展体内和体外的有效性筛选以满足客户对于有效性研究的要求。技术手段:分子生物学、酶学、细胞学、免疫学、器官与组织试验、动物试验;服务领域:心血管、脑血管、炎性疾病和自身免疫性疾病、代谢性疾病、肌骨骼疾病、神经和精神疾病、肿瘤学、肾脏病、造血系统疾病、出凝血、眼科模型、疫苗等。 生物利用度和代谢筛选开展小分子化合物和生物大分子的早期生物利用度和代谢特征的筛选试验,开展早期组织分布试验,以帮助客户迅速确定并且完善候选药物。技术手段:免疫方法(ELISA)、LC-MS/MS、HPLC、同位素标记、生物测定法;服务领域:化合物、生物大分子、中药、细胞治疗产品、基因治疗产品。 早期毒性筛选通过早期的遗传毒性试验、急性毒性试验、胚胎毒性试验、心脏毒性试验,可以快速的从系列药物中筛选出毒性较小的候选药物。单次及反复给药的毒性筛选实验:个性化设计、快速、高效并准确的预测体内药物毒性及毒靶;可在小动物及大动物上开展遗传毒性试验:Ames试...
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2019 - 03 - 11
药代动力学       药物代谢动力学 (Pharmacokinetic, PK) 是定量研究药物在生物体内吸收、分布、代谢和排泄规律,并运用数学原理和方法阐述血药浓度随时间变化规律的一门学科。血药浓度-时间曲线,简称为药-时曲线,是指血药浓度随时间变化的动态过程,反应药物在体内的代谢情况,药时曲线下的面积 (Area under curve, AUC) 代表一次用药后的吸收总量,反映了药物的吸收程度。由于血液是药物及其代谢物在体内吸收、分布、代谢和排泄的媒介,各种体液和组织中的药物浓度与血液中的药物浓度保持一定的比例关系,所以血药浓度变化具有代表性,是常用的样本。为助力抗体药物临床前和临床药代动力学研究,设计一种精准的实验方法测定血药浓度就显得尤为重要。       HTHealth在各种药代动力学研究中具有丰富的试验设计、操作和数据解读经验。可在所有种属中设计和开展药代动力学研究。实验设计和模型选择可进行调整以满足客户的要求。倘若需要,可进行外科手术,如门静脉/胆管插管。药代研究的样品可以包括血液,胆汁等,也可包括组织或肿瘤样本。分析药代样本通常采用LC/MS/MS。荀子医疗提供体内PK实验服务,包括各种给药途径(如口服、皮下、静注、腹腔注射、组合给药等)、各种组织和不同种属的实验动物(小鼠、大鼠)...
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2019 - 03 - 11
药物安全性评价研究       遵循国内GLP管理规范及国外相关法规要求,根据CFDA及参照ICH药品非临床研究相关技术指导原则,提供啮齿类、非啮齿类和非人灵长类不同种属动物的药物安全性评价研究 一般毒理:· 单次给药毒性研究· 多次给药毒性研究· 剂量范围探索或耐受量研究 体内药代动力学研究:· 生育力与早期胚胎发育毒性试验(I段-大鼠)· 胚胎-胎仔发育毒性试验(II段-大鼠和兔)· 围产期毒性试验(III段-大鼠)· 支持几用药安全性评价幼龄动物试验 免疫毒理:· 组织交叉反应· 免疫原性、抗药抗体及中和抗体检测· 免疫表型分析· T细胞依耐性抗体反应 刺激性、过敏性、溶血性试验:· 刺激试验(血管、肌肉、眼、皮肤)· 主动过敏试验· 被动过敏试验· 体外溶血试验 安全药理:· 心血管系统试验:清醒动物遥测(犬、猴)和麻醉动物(犬、猴)· 呼吸系统试验:...
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