Western blot 免疫印迹（immunblotting）又称蛋白质印迹（western blot）,他是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹（western blot）具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现在已成为蛋白分选的一种常规技术。免疫印迹（western blot）常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分选。western blot一般步骤：蛋白质抽提，蛋白质定量，变性聚丙稀酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白质转移，western blot膜的封闭和抗体孵育，western blot结果检测，western blot数据分析，提供实验报告。western blot服务内容：专业的队伍，提供完整的实验步骤和结果，提供专业的数据分析，提供电子版扫膜结果，以及灰度值分析。 服务提示1 客户可提供目标蛋白一抗，或者由HTHealth代购。 2. HTHealth可免费提取蛋白、提供二抗、免费的内参，如GAPDH，β-actin，LaminB等。 3. 我们将保留原始胶片及实验报告。
细胞黏附性是维持组织结构稳定的基本条件，也是细胞运动和发挥功能的调节因素，并且对细胞的增殖、分化有重要影响。通常可分为两类，即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。机体内许多细胞，如上皮细胞，需要牢固地定在某处发挥功能；另一些细胞，如白细胞，活跃运动，就需要不断调节细胞黏附。细胞黏附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力，提示这些细胞在相互识别及黏附机制方面发生了改变。 细胞粘附与细胞因子的刺激、趋化因子诱导的粘附分子的表达有关。体外测定细胞粘附实验方法的建立，为粘附分子的发现、白细胞与内皮细胞的粘附机理的研究、细胞因子对细胞间粘附影响的研究提供了有效的方法。客户提供：1. 生长状态良好的细胞及细胞培养条件，也可以有我公司细胞库提供；2. 实验过程中需要的药品，也可由我公司代购；3. 准确告知实验设计内容，如样品浓度等实验结果：1、 粘附实验检测原始数据、图片2、实验报告
细胞增殖是细胞分裂和生长的过程，细胞通过分裂进行增殖，把遗传信息传给子代，保持物种的延续和数量增多。检测手段细胞增殖的检测：1. 直接对分裂细胞计数来检测细胞增殖（Ki67细胞增殖检测、BrdU细胞增殖检测和EdU细胞增殖检测等）；2. MTT细胞活力检测法；3. CCK8试剂盒检测细胞活力；4. 3H同位素渗入法；5. 软琼脂培养法（Soft Agar Assay）等。需确认的信息1. 样品种属及类型2. 增殖检测方式（CCK-8或者EDU染色等）3.是否提供试剂盒4.分组及样本数量细胞增殖相关的疾病1. 增殖异常：再生障碍性贫血、前列腺肥大、家族性红细胞增多症等2. 增殖分化异常：恶性肿瘤、畸胎瘤、先天畸形等
原位末端标记染色（TUNEL） TUNEL原理 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。常见问题1、出现非特异性荧光标记a. 有些细胞或组织，例如平滑肌细胞或组织，nuclease或polymerase的酶活性水平较高，易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是，取细胞或组织后立即固定并且要充分固定，以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液，例如一些酸性固定液，导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TUNEL检测反应时间过长，或TUNEL检测反应过程中反应液渗漏，细胞或组织表面不能保持湿润，也可能出现非特异性荧光。注意控制反应时间，并确保TUNEL检测反应液能很好地覆盖样品。2、荧光背景很高a. 支原体污染。请使用支原体染色检测试剂盒检测是否为支原体污染。b. 高速分裂和增殖的细胞，有时也会出现细胞核中的DNA断裂。c. TUNEL反应过强。可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。稀释后的TdT酶需当日使用。d. 红细胞中血红蛋白导致的自发荧光产生严重干扰。此时宜选择其它细胞凋亡检测试剂盒。 3、标记效率低a. 使用乙醇或甲醇固定会导致标记...
自我更新能力和多向分化能力是干细胞的两个基本特征。干细胞的诱导分化一方面是干细胞鉴定的主要方法，另一方面也是干细胞功能学研究的主要途径。依赖于成熟的干细胞技术平台，HTHealth可以开展多种干细胞分化潜能研究的实验服务。 HTHealth不仅可以提供稳定的干细胞成骨、成脂、成软骨诱导分化服务，也可以按照您的需求，为您提供成胶质细胞、成神经元的定向诱导分化服务。平台优势成熟的干细胞技术和经验，拥有同行不可比拟的成熟平台。庞大的科研干细胞库，拥有数百种干细胞及培养试剂产品。实验流程干细胞的分离、原代和传代培养；定向诱导干细胞分化；成长曲线测定；诱导分化后细胞鉴定；结果统计分析。
液质联用技术HPLC-MS/MS 利用LC-MS/MS蛋白鉴定技术对胶条样本（即SDS-PAGE样本）、IP、co-IP、Pull-down等纯化溶液中等复杂样本进行蛋白鉴定。 技术原理 HPLC-MS/MS又叫高效液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离技术，质谱作为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后经过质谱仪质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器的到质谱图，液质联用体现了色谱和质谱的优势互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏性及能够提供相对分子质量与结果信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域的到了较多的应用。技术路线 仪器类型 Thermo-Scientific Q Exactive 应用范围 相互作用蛋白复合体或多肽的鉴定 技术优势 适合复杂样品的蛋白鉴定，如相互作用洗脱的蛋白混合液、胶条等 周期短，通量高 样品要求 1.双向凝胶胶点：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见 2.SDS-PAGE条带：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见 3.蛋白质溶液：蛋白总量5μg，浓度0.1μg/ul，缓冲液不含去污剂SDS、NP40，Triton X-100等
实验原理CCK-8（Cell Counting kit-8）试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan），生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，可采用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，间接反映活细胞数量。技术应用该方法已被广泛用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增值实验（1-6天）、细胞毒性实验、药物敏感度实验、细胞基质黏附实验等。
siRNA产品技术概述RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。 由于RNAi具有高度的序列专一性，可以特异地将特定的基因沉默，从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种有力的工具。RNAi技术可以应用到包括功能学，药物靶点筛选，细胞信号传导通路分析，疾病治疗等。 成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。专业的设计人员凭借多年的设计经验为您提供完整的RNAi实验设计服务和优化的siRNA，shRNA以及RNAi检测的探针和引物的设计服务。完善的实验设计，精准的靶标以及引物设计使您的实验节省人力和物力。 客户需提供 1、客户提供干扰序列：需要提供RNA干扰的目的基因的名称（或Gene Bank号）、序列，并与我们共同讨论实验方案；2、客户不提供干扰序列：由我们代为设计三条siRNA干扰序列。 质量保证 1、客户提供的干扰序列我们只负责构建及测序正确；2、由HTHealth代为设计的三条干扰序列，保证其中一条干扰效率不低于70%。 RNAi产品承诺 我们承诺3个RNAi产品中至少有一个有效RNAi产品，如果未能筛选到有效靶点，我们将免费为研究者重新设计并合成新的RNAi产品；有效RNAi产品：指对目的基因mRNA水平的敲减效率不低于70%。 实验介绍 慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1病毒为基础发展起来的基因研究载体，区别于逆转录病毒载体，它对于分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。...
实验原理 细胞免疫化学与免疫组织化学实验都是依据抗原抗体反应和化学显色的原理，采用标记的特异性抗体对组织或细胞内抗原的分布进行原位检测技术。细胞免疫化学将培养处理后的细胞爬片、固定、破膜、封闭后，加入一抗与抗原蛋白结合，再加入标记有荧光素的二抗与一抗进行反应，通过激光共聚焦扫描显微镜进行荧光拍摄来显示细胞中靶蛋白的表达变化和定位。 激光共聚焦扫描显微镜（Confoccal Laser Scanning Microscope, CLSM）是现在先进的细胞生物医学分析仪器之一，采用激光作扫描光源，逐点、逐行、逐面快速扫描成像，扫描的激光与荧光收集共用一个物镜，物镜的焦点即扫描激光的聚焦点，也是瞬间成像的物点。从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上，如果物体恰在焦点上，那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源，这就是所谓的共聚焦。由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光学显微镜3倍。系统经一次调焦，扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时，就可以获得样品不同深度层次的图像，这些图像信息都储于计算机内，通过计算机分析和模拟，就能显示细胞样品的立体结构。技术应用检测靶蛋白如内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、细胞因子、细胞表面抗原、肿瘤标志物。