SNP/单核苷酸多态性分析 SNP(Single Nucleotide Polymorphism)，即单核苷酸多态性，是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态。一般来说，一个SNP位点只有两种等位基因，因此又叫双等位基因。SNP在人类基因组中的发生频率比较高，大约平均每1000个碱基中就有一个多态位点。有些SNP位点还会影响基因的功能，导致生物性状改变甚至致病。单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据，因此被广泛用于群体遗传学研究(如生物的起源、进化及迁移等方面)和疾病相关基因的研究，在药物基因组学、诊断学和生物医学研究中起重要作用。 服务项目1. TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针，进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时，该探针与模板退火，即产生了适合于核酸外切酶活性的底物，从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来，破坏两荧光分子间的PRET，发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。2. SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通...
实验介绍 苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中基本、使用较多的技术方法。 细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料（苏木素）的亲和力较强。而细胞浆则相反，它含有碱性物质，和酸性染料（伊红）的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶原纤维等呈不同程度的红色。如何处理组织样本？首先需要快速取材，然后尽快的放入适量的固定液中固定，固定液需根据不同组织类型选择合适的固定液。下面给大家列举几种常见组织的固定液选择方法： 1、眼球固定液选择：FAS眼球固定液注 意 事 项：将眼球组织轻柔摘取后放入FAS眼球固定液中固定24H，结合本公司制片时的特殊手法结果更有保障，固定液是组织的10-20倍。 2、肌肉 固定液选择：GD固定液注 意 事 项：将新鲜肌肉组织取下后放入GD固定液中固定24H以上，固定液是组织的10-20倍。 3、睾丸固定液选择：Bouin's固定液注 意 事 项：固定24H后转移至75%酒精保存运输，固定液是组织的10-20倍。 4、脂肪固定液选择：脂肪专用固定液注 意 事 项：将新鲜脂肪组织取下后放入脂肪专用固定液中固定24H以上，需要使用脱脂棉花将组织压在固定液中，固定液是组织的10-20倍。 5、骨、牙齿组织固定液选择：通用型组织固定液注 意...
细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养，既包括微生物细胞的培养，细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。 细胞系因其具有无限传代增殖、体外培养、培养条件简单等原因，如今已被广泛的应用于各类疾病的研究中。 现在实验室之间的细胞系共享很普遍，污染了的细胞系被反复使用，和用错细胞系的实验研究经常发生，而这种情况很有可能在一些实验室持续数年或数十年。据统计国外实验室约20%细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复等严重后果，也浪费了研究者大量时间、精力和金钱。2011年美国国家标准学会专门颁布了一份细胞STR（ShortTandemRepeat，短串联重复序列）鉴定标准。STR鉴定目前已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定，越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分型数据。 HTHealth近年来从国内各大细胞库广泛引入细胞系，目前已筛选出280多种状态良好的细胞系，构建起华北地区较大的一家细胞库。HTHealth本着严谨负责的态度，对细胞库中几乎所有的人源细胞系进行了STR分型鉴定，目前160多种人源细胞系STR鉴定结果为阳性，为您的科研工作提供安全保障。
实验原理 免疫组化，是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使结合抗体的显色剂进行显色来确定组织或细胞内抗原，对其进行定位、定性及相对定量的研究。是生命科学研究中常用且重要的实验方法。 显然，免疫组化（IHC）结果获取过程中关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大，但其实免疫组化（IHC）过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化（IHC）染色经常很难获得优的结果，但通常可以通过对一些实验流程的变量（例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等）进行调整实现优化。实验步骤 技术优势1. 特异性强免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性，因此，免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示，如角蛋白（keratin）显示上皮成分，LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时，才会出现交叉反应。2. 敏感性高在应用免疫组化的起始阶段，由于技术上的限制，只有直接法、间接法等敏感性不高的技术，那时的抗体只能稀释几倍、几十倍；现在由于ABC法或SP三步法的出现，使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3. 定位准确、形态与功能相结合 该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。客户提供1 、待进行免疫组化的实验材料及材料信息，我们接受以下形式的实验材料组织标本根据抗原来选择适...
将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理，分散成单细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 原代细胞保留了很多来源组织的重要生理特性，能高度模仿体内的情况，且没有遗传和化学的改变。因此，原代细胞成为许多研究中理想的细胞模型。 原代细胞由于种类众多，分离方法各异，培养特性不一等因素，令许多细胞培养初学者望而却步，HTHealth多年来致力于各类原代细胞的分离培养开发，目前已从大鼠、小鼠、人、兔、鸡等不同动物的不同部位成功分离了超过400多种原代细胞。服务提示1. 根据客户需求分离特定的原代细胞。 2. 请参阅：原代培养注意事项。3. 麻烦请告知是否需进行鉴定，HTHealth根据不同细胞的特性，可提供免疫荧光，免疫组化，特殊染色（油红O染色、PAS糖原染色等）、扫描电镜、摄取实验、血管形成实验等不同的鉴定方法。 4. HTHealth可提供一站式整体课题服务，为您解决实验难题，详情请咨询技术支持。
免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术（比如流式细胞仪）测定含量。 免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透（或称为透化）、封闭、抗体孵育及荧光检测等。细胞片制备（通俗的说法是细胞爬片）是免疫荧光实验的第一步，细胞片的质量对实验的成败至关重要，原因很简单，如果发生细胞掉片，一切都无从谈起。这一步关键的是玻片（Slides or Coverslips）的处理以及细胞的活力，有人根据成功经验总结出许多有益的细节或小窍门，非常值得借鉴。固定和通透步骤重要的是根据所研究抗原的性质选择适当的固定方法，合适的固定剂和固定程序对于获得好的实验结果是非常重要的。免疫荧光中的封闭和抗体孵育与其它方法（如ELISA或Western Blot）中的相同步骤是类似的，主要的区别在于免疫荧光实验中要用到荧光抗体，因此必须谨记避光操作，此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是，标记好荧光的细胞片应尽早观察，或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存，以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。 由于操作步骤比较多，同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别，所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果，除了需要高质量的抗体，以及对实验条件进行反复优化外，还必须设立严谨的实验对照。总之，免疫荧光实验从细胞样品处理、固定、封闭、抗体孵育到最后的封片及观察拍照，每步都非常关键，需要严格控制实验流程中每个步骤的质量，才...
实时荧光定量PCR检测实验原理 实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光探针，利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应进程，最后通过内参对照计算目的基因表达差异分析或通过标准曲线对未知模板进行定量分析，具有操作简便、快速高效、高通量、高敏感性等特点。实验流程 SYBR GREEN 法和 TaqMan 探针法的区别方法优点缺点应用SYBR GREEN 法方便快捷，不必针对各个基因设计合成TaqMan探针，具有价格优势。无模板特异性，对引物特异性要求较高，需进行熔解曲线分析；灵敏度相对较低。应用于基因的差异表达分析，比如RNA干扰效果确认。TaqMan 探针法荧光化合物标记到特异性的寡核苷酸上，具有高度特异性，重复性好，荧光信号强。只适合一个特定的目标，探针价格较高。通常应用于基因拷贝数的确定，在临床诊断中常用，比如病毒和病原菌定量检测。 技术应用 定量方法原理技术应用绝对定量(Absolute Quantification，AQ)是测定目的基因在样本中的分子数目，即通常所说的拷贝数。病原体检测；转基因食品检测；基因表达研究。相对定量(Relative Quantification，RQ)测定目的基因在两个或多个样本中的含量的相对比例，而不需要知道它们在每个样本中的拷贝数。基因在不同组织中的表达差异；药物疗效考核；耐药性研究。
细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。 细胞划痕法是研究细胞转移侵袭的三大方法之一（另外两种方法分别为Transwell实验和小管形成实验），是专用于细胞迁移的检测方法，在研究肿瘤细胞转移的文章中出现频率较高。【应用范围】1. 各类肿瘤细胞侵袭能力研究 2. 细胞信号通路相关研究 3. 肿瘤转移相关基因、蛋白、miRNA、lncRNA、circRNA等相关功能研究4. 抗肿瘤药物筛选5. EMT类相关研究【品质保证】 1. 平直的划痕打造出精品结果； 2. 轻柔的洗板保护细胞不无故脱落； 3. 高清CCD拍照，保证高清晰度照片获取； 4. 博士技术团队为您提供专属于您的实验设计服务； 5. 一路相伴：服务完成后继续提供技术咨询。
技术原理 石蜡切片（paraffin section）是组织学常规制片技术中广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已广泛地用于其他许多学科领域的研究中。活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片，并作为快速切片的方法应用在临床诊断。特点 石蜡切片标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。 冰冻切片制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断．组织变化不大,能很好保存脂肪，类脂等成分。能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类，特别是对于那些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存较好。 石蜡切片（paraffin section） 组织学常规制片技术中广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切...